目的通過兔髓核細胞（nucleus pulposus cells，NPCs）自然傳代培養退變模型，觀察不同代次 NPCs 生物學特性。方法取 6～8 周齡新西蘭大白兔（體質量 1.5～2.5 kg）胸腰椎節段髓核組織，采用酶消化法獲取原代 NPCs，計為 P0 代；胰蛋白酶消化法傳代獲取第 1～3 代 NPCs，依次計為 P1、P2、P3 代。倒置相差顯微鏡觀察各代 NPCs 形態特征；膜聯蛋白 Ⅴ/碘化丙啶雙染流式細胞術檢測細胞凋亡率；免疫細胞熒光染色法和 Western blot 檢測各代 NPCs 的缺氧誘導因子 1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）、聚集蛋白多糖（Aggrecan）、Ⅱ 型膠原、基質金屬蛋白酶 2（matrix metalloproteinases 2，MMP-2）表達。結果NPCs 形態從 P0 代的三角形、多角形、多邊形逐漸向 P3 代的梭形變化，細胞體積變大，含特征性空泡細胞逐漸消失，細胞生長倍增時間延長。P0～P3 代兔 NPCs 細胞凋亡率分別為 5.47%±0.91%、13.77%±2.42%、33.46%±1.82%、38.76%±1.50%，隨著培養代數增加，細胞凋亡率明顯增加，比較差異均有統計學意義（P<0.05）。免疫細胞熒光染色示，隨著培養代數的增加，HIF-1α、Ⅱ 型膠原和 Aggrecan 熒光強度逐漸減小，MMP-2 熒光強度逐漸增加。Western blot 檢測示，HIF-1α 蛋白相對表達量在 P0 代較高，P1 代有升高趨勢，而后逐漸降低，各代次間比較差異均有統計學意義（P<0.05）。Ⅱ 型膠原蛋白相對表達量從 P0～P3 代逐漸降低，各代次間比較差異均有統計學意義（P<0.05）。Aggrecan 蛋白相對表達量從 P0～P2 代逐漸降低，兩兩比較差異均有統計學意義（P<0.05）；P2 代與 P3 代間比較差異無統計學意義（P>0.05）。MMP-2 蛋白相對表達量在 P3 代有明顯升高，除 P0 代與 P2 代間比較差異無統計意義（P>0.05）外，其余各代次間比較差異均有統計學意義（P<0.05）。結論自然傳代培養法可成功構建 NPCs 退變模型，退變時細胞形態變化、凋亡增加，細胞合成代謝減慢，分解代謝加快。