重組聚合酶鏈反應擴增乙型肝炎病毒跨直接重復序列區DNA片段方法的建立_West China Medical Journal

Authors：

 羅昊翔 , 顧隆 , 冉光鑫 , 米樹文

黔西南民族職業技術學院醫藥系（貴州興義 562400）;

Corresponding?author：

Keywords：

重組聚合酶鏈反應; 乙型肝炎病毒; 直接重復序列; 基因重組

DOI：

10.7507/1002-0179.201600246

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目的建立使用重組聚合酶鏈反應（PCR）擴增乙型肝炎病毒（HBV）跨直接重復序列（DR）區DNA 片段的方法。方法使用Primer5 引物設計軟件，以黏性末端為基礎設計引物，HBV“大三陽”乙型肝炎表面抗原（+）、乙型肝炎核心抗體（+）、乙型肝炎e 抗原HBeAg（+）] 血清提取DNA 為PCR 模板，第1 輪PCR 分段擴增，第2 輪PCR 以粘性末端為引物兩端補齊，第3 輪PCR 擴增整段HBV 跨DR 區DNA 片段。結果成功重組出HBV跨DR 區缺口的DNA 片段。結論建立了HBV 跨DR 區DNA 片段的擴增方法，為該段DNA 片段功能的研究打下了基礎。

Citation： 羅昊翔, 顧隆, 冉光鑫, 米樹文. 重組聚合酶鏈反應擴增乙型肝炎病毒跨直接重復序列區DNA片段方法的建立. West China Medical Journal, 2016, 31(5): 913-915. doi: 10.7507/1002-0179.201600246 Copy

1.	Cavter J, Sannders V. Virology: principles and applications[M]. John Wiley & Sons Ltd, 2007.
2.	Werle-Lapostolle B, Bowden S, Locarnini S, et al. Persistence of cccDNA during the natural history of chronic hepatitis B and decline during adefovir dipivoxil therapy[J]. Gastroenterology, 2004, 126(7): 1750-1758.
3.	夏國良, Nainan OV, 賈志遠, 等.單純乙型肝炎疫苗免疫后攜帶者表面抗原氨基酸置換的頻率和特征[J]. 中華實驗與臨床病毒學雜志, 2001, 15(3): 212-215.
4.	馮作化, 皇甫永穆. 醫學分子生物學[M]. 武漢: 武漢出版社, 1998.
5.	Michael RG, Joseph S. Molecular cloning: a laboratory manual[M]. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2001.
6.	黃文林. 分子病毒學[M]. 北京: 人民衛生出版社, 2002.
7.	He ML, Wu J, Chen Y, et al. A new and sensitive method for the quantification of HBV cccDNA by real-time PCR[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2002, 295(5): 1102-1107.

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7. He ML, Wu J, Chen Y, et al. A new and sensitive method for the quantification of HBV cccDNA by real-time PCR[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2002, 295(5): 1102-1107.

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